原理

人體內(nèi)的鐵有一定量以鐵蛋白和含鐵血黃素的形式貯存在骨髓中的單核-吞噬細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，幼紅細(xì)胞的線粒體中也有含鐵血黃素。這些鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應(yīng)，生成藍(lán)色的鐵氰化鐵沉淀（普魯士藍(lán)），定位于含鐵的部位。故此染色法又稱為普魯士藍(lán)反應(yīng)。

試劑

（1）4%低鐵氰化鉀25ml（低鐵氰化鉀1g 蒸餾水25ml配成4%低鐵氰化鉀）

（2）4%HCL?25ml。（HCL27.8ml 蒸餾水222.2?ml即4％HCL）

染色時1、2液混合即可。

（3）1%核固紅(核固紅配制時，用5%硫酸鋁溶解)25g硫酸鋁 500?ml蒸餾水即5%硫酸鋁,1g核固紅 100ml5%硫酸鋁即1%核固紅。

操作方法

（1）干燥血片或骨髓片，用福爾馬林37℃薰蒸固定5分鐘水洗(蒸餾水)?

（2）入4%低鐵氰化鉀鹽酸混合液37℃(先預(yù)熱20分鐘)，置入血片或骨髓片40分鐘水洗待干?

（3）入1%核固紅復(fù)染15~20分鐘，水洗待干。(蒸餾水)

結(jié)果

1. 細(xì)胞外鐵 

觀察骨髓小粒中貯存在單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)內(nèi)的鐵（在幼紅細(xì)胞之外的鐵）。
陽性反應(yīng)為骨髓小粒上見到的呈淺藍(lán)綠色均勻的無形物質(zhì)，或呈藍(lán)色或深藍(lán)色的小珠狀、粗顆粒狀或藍(lán)黑色的小塊物質(zhì)
按陽性反應(yīng)的強(qiáng)度分為5級：“—” 骨髓小粒無藍(lán)色顯現(xiàn)（提示骨髓貯存鐵缺乏）。
　　“1 ” 有少量鐵顆粒，或偶見少量鐵小珠。
　　“2 ” 有較多的鐵顆粒和鐵小珠。
　　“3 ” 有很多鐵顆粒、小珠和少數(shù)藍(lán)黑色小塊。
　　“4 ” 有極多的鐵顆粒和小珠，并有很多密集成堆的小塊。

2. 細(xì)胞內(nèi)鐵 

為幼紅細(xì)胞內(nèi)的鐵。正常幼紅細(xì)胞（主要是晚幼紅細(xì)胞）的細(xì)胞核周圍可見到1~5個呈藍(lán)色的細(xì)小鐵顆粒。含有鐵顆粒的幼紅細(xì)胞稱為鐵粒幼細(xì)胞。在油浸鏡下，連續(xù)計(jì)數(shù)100個幼紅細(xì)胞，記錄鐵粒陽性的幼紅細(xì)胞數(shù)，即為鐵粒幼細(xì)胞所占的百分率。需同時注意細(xì)胞內(nèi)的鐵粒數(shù)目、大小、染色深淺和排列。如含粗大深染的鐵粒在10個以上，并環(huán)繞細(xì)胞核排列超過核周徑2/3以上者，稱為環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞。

3.參考值

（1） 細(xì)胞外鐵 1 ~2 ，大多為2 。
（2）細(xì)胞內(nèi)鐵 20%~90%，平均值為65%。由于各實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)條件不同，此參考值也有差異。4臨床意義 1. 缺鐵性貧血時，早期骨髓中貯存鐵就已耗盡，細(xì)胞外鐵呈“—”。鐵粒幼細(xì)胞百分率減低，常3 ~4 。
（3）鐵粒幼細(xì)胞性貧血時，因血紅素合成障礙，鐵利用不良，鐵粒幼細(xì)胞增多，可見到環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞，占幼紅細(xì)胞的15%以上，骨髓增生異常綜合征中，難治性貧血伴環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞增多者，環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞>15%。

臨床意義

（1）鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血：缺鐵性貧血時，細(xì)胞外鐵消失，鐵粒幼紅細(xì)胞減少，平均為3%，因此鐵染色可作為診斷缺鐵性貧血及指導(dǎo)鐵劑治療的重要方法。?

（2）診斷鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血：鐵粒幼細(xì)胞性貧血時，細(xì)胞外鐵顯著增多（ ），其所含鐵顆粒的數(shù)目也較多，顆粒也粗大。因此本染色可作為診斷鐵粒幼細(xì)胞性貧血的重要方法。出現(xiàn)較多的環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞，可占幼紅細(xì)胞的15%以上。鐵染色是診斷鐵粒幼細(xì)胞性貧血的重要手段。
（3）MDS?時，鐵粒幼細(xì)胞的百分比可增高，其所含鐵顆粒的數(shù)目可增多，環(huán)鐵粒幼細(xì)胞常見。在鐵粒幼細(xì)胞難治性貧血，環(huán)鐵粒幼細(xì)胞在15%以上。

（4）非缺鐵性貧血如巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血等，細(xì)胞外鐵可增多，鐵粒幼紅細(xì)胞亦增多。