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細胞化學(xué)染色專題之原、早幼紅PAS染色

 漸近故鄉(xiāng)時 2016-08-06


整理:李    婷  麗水市人民醫(yī)院

審校:陳宏偉  秦皇島市第一醫(yī)院


2016年7月29日,天津血研所許議丹老師全國形態(tài)學(xué)診斷學(xué)術(shù)交流群中分享了一組非常漂亮的PAS染色圖片,引起群內(nèi)諸多老師對紅系PAS染色特點熱議及重新認識。


陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:今晚我們邀請?zhí)旖蜓兴毎瘜W(xué)室的許議丹老師為大家指導(dǎo)紅系PAS染色方面的知識,各位老師在實際工作中有什么問題可以提出來,我們將請許老師一一為大家解答!受許老師所托,先給大家分享一組骨髓PAS染色圖片。

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陳樸-復(fù)旦大學(xué)中山醫(yī)院:非常漂亮的PAS染色,紅血病之原始紅系? 


茹進偉-樂昌人醫(yī):相當(dāng)漂亮的PAS染色,陽性顆粒、細胞核都相當(dāng)清晰!


吳俠-秦皇島市第一醫(yī)院:陳老師,這是什么病人的PAS染色啊?


冷梅-青島市八院:這些細胞是原紅還是原、早紅?見于M6/MDS的原早紅?


陳雪艷-深圳市羅湖醫(yī)院:原紅和早幼紅?


趙成燕-大連醫(yī)科大學(xué)二院:原始紅細胞,漂亮的PAS染色!


韓苗苗-綏化醫(yī)院:原始紅細胞。


劉克宇-河北工大附院:MDS病人,原紅、早紅、中紅的糖原染色。


陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:以下是剛才骨髓PAS染色的瑞氏片(圖7-12),是原紅、早幼紅細胞。


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陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:我用過貝索的PAS染液,細胞和陽性顆粒不在同一層面,模模糊糊的感覺,拍照出來的效果可想而知了。大家用貝索和太陽的PAS試劑見過這么漂亮的原早紅嗎?歡迎大家來PK!


胡軒-巴中市中心醫(yī)院:是的,紅系PAS染色都不典型,而且有的感覺就像是被染液浸紅的。


楊偉雄-麗水市人民醫(yī)院:我兩種都買來染過,效果不理想,沒見過這么漂亮的PAS染色。


陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:今天我們只討論紅系PAS染色,不宜擴大討論范圍,今后我們將會陸續(xù)以小專題形式邀請?zhí)旖蜓兴S議丹老師和李楠老師為大家就細胞化學(xué)染色作專門的指導(dǎo),敬請期待!


許議丹-天津血研所:剛讓陳宏偉老師分享的圖片,主要是為了讓大家了解一下原紅、早幼紅的PAS染色酶型特點。早期紅細胞PAS酶型主要以粗顆粒、珠狀、塊狀為主,呈彌散狀分布,主要見于M6和MDS。


冷梅-青島市八院:請教許老師,若是巨幼貧的原早紅也是陽性嗎?陽性反應(yīng)是不是僅見于惡性?


高標(biāo)-開封市中心醫(yī)院:巨幼貧的原早紅不是陽性,只見于惡性,并且呈點狀陽性的要比片狀陽性的更有意義。


冷梅-青島市八院:點狀陽性?片狀陽性?還是顆粒狀陽性?彌散的陽性?呈點狀陽性的要比片狀陽性的更有意義,對于這句話很感興趣,請許老師一并講解!


許議丹-天津血研所:您指的點狀和片狀,應(yīng)該是中、晚幼紅細胞的兩種酶型。這兩種酶型在臨床意義上沒有太大的區(qū)別。


李曉麗-本溪中心醫(yī)院:許老師,我只見過MDS患者的幼紅細胞呈彌散陽性。請教一下幼紅細胞呈顆粒狀陽性和原始淋巴細胞的PAS特點有什么區(qū)別?是不是原早紅的陽性顆粒比較均勻呢?


張宏-蘇大附二院:許老師,教科書上一般都講PAS染色在M6中診斷價值很大,幼紅細胞呈顆粒狀陽性。但我們在實際工作中M6幼紅陽性的并不常見,是試劑的原因,還是M6幼紅細胞陽性率本來就不高。我們平時M6碰到的不是很多,按您的經(jīng)驗,M6中幼紅細胞PAS染色出現(xiàn)陽性的情況大概占多少?


許議丹-天津血研所:您說的這種情況有可能是試劑問題。原、早幼紅PAS強陽性主要見于M6和MDS,少部分呈陰性反應(yīng),不是所有的M6的PAS都是陽性的。剛才有老師提到陽性反應(yīng)是不是僅見于惡性疾病,這個大家要注意啊,中晚幼紅的陽性強度不是診斷貧血惡性程度的標(biāo)準(zhǔn)。


李曉麗-本溪中心醫(yī)院:中晚幼紅的陽性強度不是診斷貧血惡性程度的標(biāo)準(zhǔn),是不是只要中晚幼紅出現(xiàn)陽性,不管強弱都是惡性的呢?還是只能看原、早幼紅是否陽性,不能看中晚幼紅呢?


許議丹-天津血研所:很多良性貧血,如IDA有核紅PAS可以是強陽性。值得一提的是,原淋的陽性顆粒是散在分布,而紅系的是彌散狀分布。


陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:許老師,散在和彌散怎樣區(qū)別?可以用通俗一點的語言講嗎?


柏世玉-泰安中心醫(yī)院:散在顆??蓴?shù),彌散細小不可數(shù)!


許議丹-天津血研所:柏老師說的挺好,可以這樣理解,散在背景比較干凈。


張宏-蘇大附二院:以前我們也是自己配的試劑,我們一開始懷疑MDS都會做一下PAS,后來發(fā)現(xiàn)陽性率太低,加上有點依賴其他檢測,組化做的少了??礃幼右院筮€是應(yīng)該再做下PAS染色! 


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莫小歡-廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院:各位老師,以上是我室一例M6的骨髓瑞氏染色(圖13-18)及貝索試劑的紅系PAS染色(圖19-24)。陳老師,您剛才發(fā)的PAS染色還可以看出細胞核結(jié)構(gòu),能辨別是哪類細胞,非常不錯!


陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:剛才發(fā)的這些PAS染色圖片是許老師自己配的試劑做的,跟貝索試劑一對比,優(yōu)點鮮明,不比不知道,一比嚇一跳。


陳雪艷-深圳市羅湖醫(yī)院:我用貝索的試劑陽性率也很低,所以就放棄了!


許議丹-天津血研所:很多MDS是弱陽性反應(yīng),貝索的我們試用過,弱陽性根本染不出來。我們室的李楠老師對有核紅細胞PAS染色在血液病中的臨床意義做過詳細的統(tǒng)計,詳見《骨髓有核紅細胞過碘酸-堿性復(fù)紅染色對血液病診斷》一文。


陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:這跟教材好像不一致吧?我記得教材好像說多數(shù)良性貧血的幼稚紅細胞是陰性的,而MDS和M6的幼稚紅細胞一般是陽性的?


許議丹-天津血研所:是和教材不一致,所以提出來讓大家注意。


冷梅-青島市八院:許老師,這么說巨幼貧的幼紅也可以強陽性了。


許議丹-天津血研所:不是的,巨幼貧是弱陽性反應(yīng)。很多書介紹再生障礙性貧血(AA)有核紅PAS是陰性的,實際上AA有核紅可見陽性反應(yīng)。


陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:請問許老師,您還發(fā)現(xiàn)PAS染色在理論和實際工作中有哪些出入呢?期待您的系統(tǒng)總結(jié)!


侯霞-云南省第二人民醫(yī)院:陳老師,教材和實際有很多不相符,以前一直按教材來應(yīng)用,根本看不懂,自從去了天津血研所后才發(fā)現(xiàn)細胞化學(xué)染色真正的意義。


陳宏偉-秦皇島市第一醫(yī)院:沒想到今天這么一個關(guān)于原、早幼紅PAS染色的小討論會牽出這么多背后的問題!


莊順紅-浙大金華醫(yī)院:今天參與討論的人實在是多,足見大家對PAS染色存在較多困惑,希望許老師能總結(jié)一下PAS在紅系、淋系、巨核系等的鑒別要點,以及PAS對判斷良惡性疾病的應(yīng)用價值。


總結(jié)


早期紅細胞PAS酶型主要以粗顆粒、珠狀、塊狀為主,呈彌散狀分布。原、早幼紅PAS強陽性主要見于M6和MDS。陽性反應(yīng)并不僅見于惡性疾病,中晚幼紅的陽性強度不是診斷貧血惡性程度的標(biāo)準(zhǔn),這一點大家要特別注意!有些實際情況跟教材是不相符的,很多教材中說多數(shù)良性貧血的中晚幼紅PAS是陰性的,MDS和M6一般呈陽性反應(yīng)。但實際工作中很多良性貧血,如缺鐵性貧血(IDA)有核紅PAS可以是強陽性;巨幼細胞性貧血可以是弱陽性反應(yīng);AA有核紅可見陽性。很多MDS也可以是弱陽性反應(yīng),少部分呈陰性反應(yīng);而且不是所有的M6的PAS都是陽性的。值得一提的是,紅系的PAS是彌散狀分布,而原淋的陽性顆粒是散在分布(彌散狀細小不可數(shù),而散在顆??蓴?shù))。


附:天津血研所細胞化學(xué)室李楠、許議丹老師的文章《骨髓有核紅細胞過碘酸-堿性復(fù)紅染色對血液病診斷》部分摘錄:


1、有核紅細胞PAS染色有助于診斷和鑒別各種貧血和白血病。從實驗結(jié)果看,除正常骨髓象和CLL為陰性外,大多數(shù)病種均可見陽性。白血病所占陽性病例較高,均在50%以上,AML明顯強于ALL。通常用有核紅細胞PAS是否陽性并結(jié)合形態(tài)學(xué)來確定M6,但是M2患者的有核紅PAS陽性率也很高,因此PAS陽性并不是M6所特有。因此M6的診斷還應(yīng)結(jié)合臨床骨髓形態(tài)及免疫分型等來確診。有核紅細胞PAS陽性有助于診斷M6和巨幼細胞性貧血(MegA)。MegA曾有文獻報道PAS為陰性,本文總結(jié)15例MegA有40%可見陽性,但陽性率均小于10% ;而M6中有57%為陽性病例,且陽性率大于10%,因此PAS陽性率10%有助于鑒別M6和MegA。


2、MDS涂片中有核紅細胞PAS所占陽性例數(shù)均大于60%,比部分白血病高,MDS三種陽性率無明顯差別,有半數(shù)以上病例陽性率大于10%,但也有相當(dāng)一部分MDS陽性較低。RAEB陽性強度略強,MDS有核紅PAS染色陽性與文獻報道相同,與文獻報道陰性不相符。總之,除AML和IDA外,MDS較其它血液病明顯增高。


3、在一般貧血和血小板減少病種中,IDA中50%以上病例有核紅細胞PAS陽性,48% 陽性率大于10%,最高可達54%,是貧血中反應(yīng)最強的。AIHA陽性率明顯增高,溶血性貧血中等強度,與文獻相一致。從實驗結(jié)果可見,紅系增生骨髓象的有核紅細胞PAS除MegA外均表現(xiàn)較高的陽性率。AA通常報道陰性,本文SAA 35例有1例陽性,CAA 41例中有5例陽性,占12.19%,陽性率最高6%。


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