診斷侵襲性真菌病的“雙子星”——G實(shí)驗(yàn)和GM實(shí)驗(yàn)

G實(shí)驗(yàn)和GM實(shí)驗(yàn)是常用于診斷侵襲性真菌感染的兩種常用的血清學(xué)試驗(yàn)。由于具有取材方便、結(jié)果快速、敏感度和特異性較高等特點(diǎn)，在臨床上得到越來越廣泛的應(yīng)用。那么什么是G實(shí)驗(yàn)和GM實(shí)驗(yàn)?zāi)?？這兩種檢測能夠反映哪些侵襲性真菌感染？結(jié)果異常一定是真菌感染嗎？我們今天就來聊一聊這些有關(guān)話題。

在介紹G實(shí)驗(yàn)和GM實(shí)驗(yàn)之前，首先來了解一下什么是侵襲性真菌病，以及引起侵襲性真菌病的常見病原體有哪些。

侵襲性真菌病(IFD)是一種由侵襲性真菌感染引起的機(jī)會性感染，之所以稱為機(jī)會性感染，是因?yàn)槊庖吡φ５膫€(gè)體很少發(fā)生，通常在免疫系統(tǒng)功能低下的人群，如接受器官移植、骨髓移植、化療、艾滋病毒感染以及長期使用免疫抑制劑的患者中發(fā)生。這些真菌可以入侵人體的器官和組織，包括肺部、肝臟、脾臟、腎臟和中樞神經(jīng)系統(tǒng)，嚴(yán)重者危及患者生命。

引起侵襲性真菌病的常見病原體有如下幾種

1. 假絲酵母菌 又稱念珠菌，可侵犯皮膚、粘膜和內(nèi)臟，表現(xiàn)為急性、亞急性或慢性炎癥，大多為繼發(fā)性感染。假絲酵母菌種類很多，對人致病的以白色念珠菌最常見，光滑、熱帶等念珠菌也越來越常見。

2. 曲霉菌 曲霉菌是環(huán)境中普遍存在的腐生菌，其中，煙曲霉是引起侵襲性曲霉病最常見的曲霉菌。侵襲性曲霉菌病危害性很大，一些患者群體的死亡率高達(dá)90%。

3. 新型隱球菌 新型隱球菌可以在自然環(huán)境中生長，包括土壤、鳥糞、腐木中。新型隱球菌感染可以導(dǎo)致嚴(yán)重的疾病，主要累及免疫系統(tǒng)受損的人群，會導(dǎo)致肺炎、腦膜炎和敗血癥等疾病。

4.耶氏肺孢子菌 舊稱卡氏肺孢子菌，能夠引起免疫功能受損個(gè)體中的肺炎（PCP），肺孢子菌肺炎是一種可能危及生命的感染，多發(fā)生于免疫功能受損人群。

5.毛霉菌 毛霉菌在自然界中也普遍存在，可見于腐爛植被和土壤中。在人類感染中最常見的菌屬為根霉屬、毛霉屬、根毛霉屬；在免疫力受損人群中發(fā)生的破壞性很大的鼻-眶-腦感染和肺部感染是這些真菌導(dǎo)致的最常見的綜合征。

了解了侵襲性真菌病和常見的病原體，我們再來介紹一下G實(shí)驗(yàn)、GM實(shí)驗(yàn)，重點(diǎn)關(guān)注其臨床應(yīng)用、結(jié)果解釋和臨床上常見的影響因素。

01

G實(shí)驗(yàn)

G實(shí)驗(yàn)也稱為(1,3)-β-D-葡聚糖（BDG）檢測，(1,3)-β-D-葡聚糖是許多真菌的細(xì)胞壁成分，可以在受感染個(gè)體的血清中檢測到。(1,3)-β-D-葡聚糖能夠激活鱟（讀作hòu，一種稱為活化石的甲殼類動物）血液中的凝血因子G，從而誘發(fā)凝血級聯(lián)反應(yīng)。G實(shí)驗(yàn)就是應(yīng)用這種原理來檢測標(biāo)本中的(1,3)-β-D-葡聚糖含量。

(1,3)-β-D-葡聚糖是許多真菌的細(xì)胞壁成分

臨床應(yīng)用

G實(shí)驗(yàn)多用于診斷侵襲性念珠菌病，如念珠菌引起的腹腔、尿路和全身系統(tǒng)性感染。由于很多其它真菌的細(xì)胞壁中都有β-D-葡聚糖，如曲霉菌、耶氏肺孢子菌，因此，G實(shí)驗(yàn)也可以用于診斷這些真菌導(dǎo)致的感染。G實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果呈陰性時(shí)的陰性預(yù)測值較高，即當(dāng)檢測結(jié)果為陰性時(shí)患者不太可能存在念珠菌或耶氏肺孢子菌感染，因此可以用于指導(dǎo)停止經(jīng)驗(yàn)性抗真菌治療的一個(gè)指標(biāo)。

檢驗(yàn)結(jié)果解釋

G實(shí)驗(yàn)常用的標(biāo)本類型為血清，目前尚未明確診斷侵襲性真菌病的精確臨界值，我們實(shí)驗(yàn)室采用的標(biāo)準(zhǔn)如下：

當(dāng)結(jié)果小于100.5pg/ml，一般認(rèn)為陰性；100.5~151.5pg/ml之間時(shí)可能為感染初期，建議連續(xù)動態(tài)檢測；當(dāng)大于151.5pg/ml時(shí)，須考慮是否存在念珠菌、曲霉菌或肺孢子菌引起的感染。

在臨床中解讀G實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，需要關(guān)注G實(shí)驗(yàn)的干擾因素

一些醫(yī)源性因素會導(dǎo)致G實(shí)驗(yàn)的假陽性。如藥品中的β-葡聚糖污染(如黃芪多糖、香菇多糖可含有β-D-葡聚糖)、含有羧甲基纖維素的激素(如注射潑尼松龍)、使用含β-葡聚糖的高污染材料如紗布、海綿、某些纖維素透析膜，易使結(jié)果出現(xiàn)假陽性。

02

GM實(shí)驗(yàn)

GM實(shí)驗(yàn)即半乳甘露聚糖抗原檢測（Galactomannan antigen)，半乳甘露聚糖抗原是曲霉菌細(xì)胞壁的主要成分。除了曲霉菌之外，許多真菌的細(xì)胞壁也含有半乳甘露聚糖，如鐮刀菌、青霉菌、莢膜組織胞漿菌等。

半乳苷露聚糖是曲霉菌細(xì)胞壁的主要成份

用于檢測GM的試劑盒

臨床應(yīng)用

GM實(shí)驗(yàn)可作為曲霉菌病的早期輔助診斷指標(biāo)，在某些患者出現(xiàn)侵襲性曲霉菌病的臨床體征或癥狀之前，即可在其血清中檢測到半乳甘露聚糖抗原。GM實(shí)驗(yàn)也可作為抗真菌治療效果的預(yù)后指標(biāo)。

除了血清標(biāo)本之外，還可以檢測肺泡灌洗液（BALF）、腦脊液和胸腔積液標(biāo)本，BALF中的GM檢測可能比血清的敏感性更高，許多醫(yī)療機(jī)構(gòu)將BALF液中GM實(shí)驗(yàn)作為侵襲性肺曲霉菌病診斷的常用輔助手段。

檢測結(jié)果解釋

GM檢測結(jié)果為光密度(OD)指數(shù)，目前尚沒有統(tǒng)一的參考值標(biāo)準(zhǔn)，有研究表明血清GM檢測的臨界值設(shè)定為0.5時(shí)能取得較高的診斷效能。為了保證有更高的診斷特異性，我們實(shí)驗(yàn)室采用的參考值上限為0.8。BALF中的GM也沒有一致的參考區(qū)間，有研究以BALF中GM實(shí)驗(yàn)OD值≥0.5值作為陽性標(biāo)準(zhǔn)，臨床中可作參考。

在臨床中也應(yīng)注意GM實(shí)驗(yàn)的干擾因素

半乳甘露聚糖抗原存在于多種食物中，特別是谷類食品和奶油點(diǎn)心。牛奶中常含有高濃度的半乳甘露聚糖，當(dāng)合并消化道屏障受損時(shí)，食入這些食物可導(dǎo)致結(jié)果的假陽性。有些臨床用藥也會導(dǎo)致GM實(shí)驗(yàn)假陽性，如接受靜脈用免疫球蛋白、輸入血制品或某些抗生素時(shí)。

最后，我們來畫下本文的重點(diǎn)~

假絲酵母菌和曲霉菌是引起侵襲性真菌病最為常見的兩種病原體。G實(shí)驗(yàn)有助于診斷侵襲性假絲酵母菌病，在曲霉菌感染、耶氏肺孢子菌病時(shí)也可以增高。GM實(shí)驗(yàn)多用于輔助診斷侵襲性曲霉菌病。在常見的侵襲性真菌感染病原體診斷中，G實(shí)驗(yàn)和GM實(shí)驗(yàn)無法反映隱球菌、毛霉菌等導(dǎo)致的感染。由于受到某些干擾因素的影響，結(jié)果判讀時(shí)應(yīng)結(jié)合臨床和其它微生物學(xué)數(shù)據(jù)，如真菌熒光染色、真菌培養(yǎng)、PCR、影像學(xué)或組織病理學(xué)檢查，必要時(shí)多次送檢，動態(tài)觀察結(jié)果的變化，綜合評估患者的感染狀態(tài)。

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投 稿：郝明巨

責(zé) 編：亓向美

審 核：楊吉偉

作者介紹：

郝明巨，男，醫(yī)學(xué)博士，碩士研究生導(dǎo)師，美國Rutgers大學(xué)訪問學(xué)者。山東第一醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科質(zhì)量組負(fù)責(zé)人。主持山東省自然科學(xué)基金、濟(jì)南市臨床科技創(chuàng)新計(jì)劃等多項(xiàng)課題，以第一或通訊作者發(fā)表論文20余篇，其中SCI論文11篇。兼任中國醫(yī)學(xué)裝備協(xié)會分子診斷學(xué)分會委員、山東中醫(yī)藥學(xué)會臨床檢驗(yàn)專業(yè)委員會委員、山東中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會臨床檢驗(yàn)專業(yè)委員會委員、山東省醫(yī)師協(xié)會耐藥監(jiān)測與防控專業(yè)委員會委員、山東省研究型醫(yī)院協(xié)會臨床微生物學(xué)分會常委。