2007年以前，全球使用固體培養(yǎng)和藥敏試驗技術(傳統(tǒng)藥敏試驗)進行實驗室MTB耐藥診斷，傳統(tǒng)藥敏試驗可檢測一線抗結核藥物(異煙肼、利福平、乙胺丁醇、鏈霉素)和二線抗結核藥物(卡那霉素、氧氟沙星等)的耐藥情況，結果較可靠，價格便宜，但所需時間較長，約2～3個月^[1,2]。為了提高耐藥診斷速度，世界衛(wèi)生組織2007—2010年陸續(xù)推薦了多種新技術，如液體培養(yǎng)和藥敏試驗技術(液體藥敏試驗)、分子生物學快速耐藥檢測技術[包括線性探針(LPA)、自動化Gene–Xpert等技術]。液體藥敏試驗將耐藥診斷時間縮短至1個月，可檢測一線抗結核藥物和二線抗結核藥物的耐藥情況，結果較可靠，但價格較貴，且容易污染^[3]。線性探針技術檢測耐藥需6 h，適用于涂陽痰標本和培養(yǎng)菌株，適合地市及以上級別實驗室使用，但價格較貴，僅能用于異煙肼和利福平的耐藥性檢測^[2,4]。自動化Gene–Xpert技術檢測耐藥需90 min，操作簡便，可在縣級實驗室使用，適用于涂陽和涂陰痰標本(目前國內(nèi)注冊僅對涂陽肺結核進行耐藥檢測)，但價格較貴，僅能檢測利福平耐藥^[5,6]?？傊?，不同的耐藥檢測技術各有優(yōu)缺點，且不能相互替代。

一、MTB耐藥診斷流程

全球基金結核病項目為31個省、1/3地市、1/3縣配備了傳統(tǒng)藥敏試驗設備和967臺分子生物學快速耐藥檢測設備(包括線性探針和自動化Gene–Xpert等)。目前許多實驗室已配備了多種耐藥檢測設備，如果同時使用，不但浪費資源，且檢測結果不一致，給醫(yī)生的診斷和化療方案制定帶來許多困惑。因此，有必要制定MTB耐藥診斷流程，充分發(fā)揮分子生物學快速耐藥檢測技術和細菌學藥敏試驗優(yōu)勢。中國結核病預防控制中心根據(jù)不同耐藥檢測技術制定了MTB耐藥診斷流程，并經(jīng)過專家論證后在中蓋結核病項目和全球基金項目地區(qū)推廣使用。

1．線性探針技術和傳統(tǒng)(或液體)藥敏試驗聯(lián)用的耐藥診斷流程：

縣級定點醫(yī)院、疾病預防控制中心將涂陽肺結核患者的3個痰標本送往地市級定點醫(yī)院，實驗室先采用線性探針技術檢測，檢測結果為利福平敏感時不再進行傳統(tǒng)(或液體)藥敏試驗；檢測結果為利福平耐藥時，再取這些患者痰標本進行二線傳統(tǒng)(或液體)藥敏試驗，檢測是否為廣泛耐藥結核病。需要特別注意的是，耐藥非高危人群(新涂陽肺結核)第1次快速耐藥檢測為利福平耐藥時，必須采集另1份涂陽痰標本進行復查，如果第2次快速耐藥檢測仍為利福平耐藥，則可診斷為利福平耐藥；如果第2次快速藥敏檢測為利福平敏感，則診斷為利福平敏感；如果未行第2次快速藥敏檢測，僅1次利福平耐藥結果，則視為利福平敏感。

2．Gene–Xpert技術和傳統(tǒng)(或液體)藥敏試驗聯(lián)用的診斷流程：

縣級實驗室采用Gene–Xpert技術對涂陽肺結核患者進行耐藥檢測，如果檢測結果為利福平耐藥，應將痰標本送往地市級定點醫(yī)院進行異煙肼、氧氟沙星、卡那霉素傳統(tǒng)(或液體)藥敏試驗。需要特別注意的是，耐藥非高危人群第1次Gene–Xpert檢測為利福平耐藥時，必須采集另1份涂陽標本進行復查，如果第2次Gene–Xpert(或LPA)檢測為利福平耐藥，則可診斷為利福平耐藥；如果第2次Gene–Xpert(或LPA)檢測為利福平敏感，則診斷為利福平敏感；如果未行第2次Gene–Xpert(或LPA)檢測，則視為利福平敏感。