Nature深度解讀：癌癥免疫療法新靶點——NKG2A，前途不明。NKG2A–CD94與載肽HLA-E結合會導致NKG2A中基于細胞質免疫受體酪氨酸的抑制性基序磷酸化，從而導致抑制性信號的傳播，抑制來自激活性受體（如NKG2D、TCR）的競爭信號。Montfoort等使用的NKG2A抗體monalizumab是一種first-in-class人源化IgG4抗體，可阻止NKG2A–CD94與HLA-E結合。那么，NKG2A免疫檢查點抑制劑能否與PD-1/PD-L1抑制劑產生協同作用呢？

《Nature》：免疫檢查點抑制劑相關毒性的長期影響。免疫檢查點抑制劑(ICI)已成為癌癥治療的核心支柱。此外，白癜風（對黑素細胞的自身免疫反應）的發(fā)生提供了僅在黑色素瘤患者中ICI抗腫瘤活性的可靠指標，也表明irAE和抗腫瘤免疫可能在機制上相關。盡管隨機臨床試驗缺乏有力的證據，但通過提供癥狀管理、暫停ICI和給予高劑量糖皮質激素（或治療類固醇難治性irAE的潛在其他免疫抑制藥物），可合理有效地管理急性重度irAE。

免疫細胞家族成員：調節(jié)T細胞(Treg)感情最大的敵人是成長。認識Treg 細胞。除此之外, Treg還能抑制NK細胞的增殖、細胞因子分泌和細胞毒作用,以及對單核/巨噬細胞、樹突狀細胞、B 細胞等免疫活性細胞起抑制作用。Treg 細胞可通過CTLA-4 、TGF-β及GITR 等直接與靶細胞上的相應受體結合, 并抑制靶細胞上IL-2Rα鏈的表達, 降低靶細胞對IL-2的反應性從而抑制效應T 細胞的增殖。Treg 細胞相關?；貜蚑reg：免疫細胞家族成員：Treg細胞。

《Nature》子刊：CD8 T細胞的數量竟決定癌癥患者的預后！要知道，干細胞樣T細胞是對癌癥免疫治療藥物產生反應的細胞，它可以恢復免疫系統(tǒng)抵抗癌癥的能力。顯然，APCs和干細胞樣T細胞相輔相成，共同對抗癌癥的侵襲，這也給我們以啟發(fā)，過去，我們把癌癥免疫治療的缺陷歸結于其表面表達的免疫檢查點蛋白，以及腫瘤產生的PD-L1分子，倘若具有干細胞活性的CD8陽性T細胞數量足夠，癌癥免疫治療的療效是否會因此有所不同呢？

詳解免疫熒光半定量分析誤區(qū)。免疫熒光染色的關鍵是熒光二抗，之后在熒光場下進行拍照，留取照片。表面上看，這個過程與DAB染色后類似，但實際上其中存在相當多的變量，正是這些變量導致免疫熒光染色不適合做半定量分析。熒光染色面積？③采用免疫組織化學染色或免疫細胞化學染色（DAB法）進一步對蛋白表達的位置（胞外、胞膜、胞質、胞核）進行評價，通過采用半定量分析法分析蛋白表達水平，鞏固Western Blot半定量分析的結果；

ImageJ分析免疫組化圖片（附ImageJ的多種實用技巧）ImageJ軟件中OD值與灰度值如何轉換？此時灰度值255變成了OD值0，灰度值0變成了OD值2.71:再次以小鼠肺免疫組化染色為例，將鼠標放于下圖十字處可在紅框處得到圖片的OD值為0，括號內為對應灰度值為255，OD值為0說明空白背景處沒有任何陽性物質.此外灰度為0（純黑處）OD值為2.71：因此，免疫組化圖片分析應該以OD值分析，背景純白OD值接近0，DAB著色越深OD值越大，物質的量越多。

包載脂溶性藥物或水溶性藥物的PLGA-b-PEG納米載體的制備

一個細胞的死亡會對周圍的細胞產生影響嗎？它們分別是細胞凋亡，細胞壞死，細胞焦亡，以及鐵死亡。這篇文章主要討論非凋亡的其他細胞程序性死亡包括：細胞壞死、細胞焦亡、鐵死亡、entotic cell death（小編也解釋不清）、 netotic cell death（小編也解釋不清）、parthanatos（見如下解釋）、溶酶體依賴的細胞死亡、自噬介導的細胞死亡、一種依賴于堿性pH內環(huán)境的細胞死亡新形式堿死亡（alkaliptosis）、氧化應激介導的死亡等等。

Zhong B, Zhang L, Lei C, Li Y, Mao AP, et al. (2009) The ubiquitin ligase RNF5 regulates antiviral responses by mediating degradation of the adaptor protein MITA. Immunity 30: 397-407.Tsuchida T, Zou J, Saitoh T, Kumar H, Abe T, et al. (2010) The ubiquitin ligase TRIM56 regulates innate immune responses to intracellular double-stranded DNA. Immunity 33: 765-776.

常用的檢查方法舉例1）Western Blot檢測LC3利用Western Blot檢測LC3-II/I比值的變化以評價自噬形成。自噬形成時，胞漿型LC3（即LC3-I）會酶解掉一小段多肽，轉變?yōu)椋ㄗ允审w）膜型（即LC3-II），因此，LC3-II/I比值的大小可估計自噬水平的高低。P62蛋白是自噬激活的標記物，LC3II增加，說明了自噬小體的增加，如果P62同時減少的，說明自噬活性增強，如果P62同時增加，說明自噬小體降解過程抑制，即自噬過程下游被抑制。

在隨后的發(fā)展中，低劑量的環(huán)磷酰胺以及其他的烷基化試劑，逐漸被用于治療多種癌癥，包括乳腺癌、卵巢癌和兒科癌癥等等，因此，環(huán)磷酰胺也被稱為第一種廣譜抗癌藥[2]。Weinstock教授團隊的研究人員就發(fā)現，與阿霉素這種同樣是引起DNA斷裂，引發(fā)細胞凋亡的抗癌藥相比，單獨使用高劑量的環(huán)磷酰胺，能將小鼠骨髓中的淋巴瘤細胞降為阿霉素的1/10。在人們之前的認知中，環(huán)磷酰胺和阿霉素一樣，都是用過引發(fā)DNA斷裂，誘導細胞死亡的。

Prism 7如何計算IC50和EC50?定義：IC50(半數抑制濃度，反應阻斷劑或拮抗劑的數據):it is the half maximal (50%) inhibitoryconcentration (IC) of a substance (50% IC, or IC50).IC50計算：利用GraphPad Prism 7軟件進行計算：EC50計算：GraphPad Prism 7.參照IC50計算將X轉換成Log(X)，再利用“Transform of Data 1”進行曲線擬合：

化療與腫瘤免疫原性細胞死亡。小鼠脾細胞或人的外周血單核細胞(FPR1CC)可表達正常功能的FPR1，用蒽環(huán)類化療藥處理野生型腫瘤細胞，它們會向垂死或死亡的腫瘤細胞遷徙，活的腫瘤細胞則無此現象，并且細胞間有超過60 min的接觸，反之，FPR1缺陷細胞(來自于FPR1－/－小鼠，人的細胞型別為FPR1CA或FPR1AA)，不存在如此長時間的相互作用，而且DC和垂死或死亡的Anxa－/－腫瘤細胞之間也不能形成穩(wěn)定的接觸。

Nature子刊 | Rnf5 - / - 小鼠改變的腸道菌群可增加抗腫瘤免疫抑制黑素瘤生長。同處一室的Rnf5- / -和WT小鼠消除了抗腫瘤免疫和腫瘤抑制表型，而在Rnf5- / -小鼠中富含的11種細菌菌株（包括B. rodentium）的轉移建立了抗腫瘤免疫力并抑制了無菌WT小鼠中黑素瘤的生長。圖4 將Rnf5 - / -小鼠中富含的選擇細菌菌株口服給予WT小鼠可增強抗腫瘤免疫應答。圖5 Rnf5- / -小鼠的腸上皮細胞激活免疫應答并改變抗微生物肽（AMP）的表達。

UPR通過阻止普通蛋白的合成，同時上調ER殘存伴侶蛋白或其它通路的調節(jié)成分，這些伴侶蛋白介導的能量代謝確保ER蛋白高效率地折疊，為細胞生存提供一個較好的環(huán)境。在ER應激時，Bip(結合在未折疊蛋白上的)和其失去聯系而解離，Irel、PEPK進行同源寡聚化，刺激絲氨酸.蘇氨酸蛋白激酶區(qū)域內的反.自身磷酸化，PEPK能翻譯起始因子eIF2α，在蛋白折疊條件被減弱時eIF2α能終止翻譯或阻止新合成的蛋白持續(xù)進入ER。

比較有趣的是，來自美國德州 MD Anderson 癌癥研究中心的甘波誼教授的課題組發(fā)現， 在代謝應激（比如葡萄糖缺失）條件下，BAP1和PRC1都被招募到CHOP 和 ATF3的啟動子上，調控位于 CHOP 和 ATF3的啟動子上的H2A泛素化水平，從而抑制CHOP 和 ATF3的轉錄調控，這進一步導致下游大量其它基因的表達水平變化，其最終目的是幫助細胞解決由代謝應激引起的蛋白質錯誤折疊問題， 從而維持細胞繼續(xù)存活。

Diehl課題組發(fā)現，UPR和晝夜節(jié)律共同作用于細胞生物鐘，癌細胞利用UPR的方式使它們能在對普通細胞來說“有毒”的情景下繼續(xù)存活。3.腫瘤細胞晝夜節(jié)律存在變異。Bmal1是一種轉錄因子，主要調節(jié)晝夜節(jié)律基因表達，它的水平高低指示光暗周期，細胞處于黑暗時，Bmal1的濃度最高。myc驅動腫瘤失去了晝夜節(jié)律，但是機體其他細胞仍維持著晝夜節(jié)律。這項研究首次報道，癌細胞利用UPR抑制Bmal1生產，使晝夜節(jié)律短路，從而活得更久。

Diehl的研究小組發(fā)現：UPR和晝夜節(jié)律連接在一起，引導細胞細胞正常運作，并且癌細胞通過UPR操縱生物鐘，使其能夠在殺滅正常細胞的條件下存活。由于蛋白質生產與晝夜節(jié)律相關聯，因此Diehl小組大膽的提出了一個假設：錯誤折疊的蛋白質會改變癌細胞的晝夜節(jié)律。這是首個發(fā)現癌癥通過控制Bmal1蛋白質合成抑制晝夜節(jié)律的研究——癌細胞通過使用UPR抑制Bmal1并使其晝夜節(jié)律失調，從而使得癌細胞存活時間更長。

科研小白血淚之細胞劃痕實驗經驗總結。我為什么會選擇做細胞劃痕實驗？2）適合研究細胞與胞外基質（ECM）、細胞與細胞之間相互作用引起的細胞遷移。2）待細胞鋪滿后，用200ul槍頭垂直于孔板和線制造細胞劃痕，盡量保證各個劃痕寬度一致, 人工槍頭制造劃痕難以保證劃痕寬度的一致性，影響實驗結果，這也是該方法最大的缺陷，有條件的同學可以選擇culture Insert（如下圖），將細胞接種于Dish中間的Insert，培養(yǎng)。

然后NLRP3上的一個多堿性區(qū)域與dTGN上帶負電荷的PtdIns4P相互作用，將NLRP3招募到dTGN上。本文綜合利用生化、成像和遺傳學方法等方法，巧妙的運用細胞株重組系統(tǒng)實驗揭示了NLRP3激活的分子機制，進一步在原代性巨噬細胞中驗證，揭示了不同來源、以及化學性質和結構特質上千差萬別的NLRP3激動劑，觸發(fā)的一個共同的細胞信號:TGN分解為dTGN，其中NLRP3通過其多堿性區(qū)域與dTGN上的PtdIns4P之間的離子鍵被募集到dTGN上。