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學(xué)習(xí)筆記一生化常見反應(yīng)Trinder反應(yīng)

 求真我gcvbmj6p 2025-10-14

Trinder反應(yīng)

Trinder反應(yīng),又稱“偶聯(lián)終點比色法”,是臨床生化檢測中常用的指示(顏色)反應(yīng)。此反應(yīng)首先由Trinder于1969年提出,故名Trinder反應(yīng)。最初使用苯酚作生色劑,后來提出十余種化合物替代苯酚,使反應(yīng)的靈敏度得以顯著提高。?Trinder反應(yīng)構(gòu)成了葡萄糖、膽固醇、甘油三酯及尿酸等酶法測定的基礎(chǔ)。臨床生化許多檢測項目都應(yīng)用了Trinder反應(yīng),如葡萄糖、甘油三、膽固醇、尿酸、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等。

其原理為:被測物質(zhì)通過酶作用產(chǎn)生過氧化氫(H?O?),在過氧化物酶(POD)和特定色原性物質(zhì)(如4-氨基安替比林、苯酚等)的作用下,生成有色的醌亞胺化合物。該化合物的顏色深淺與被測物質(zhì)濃度呈正比,通過測定吸光度可計算出被測物質(zhì)的含量。

反應(yīng)步驟(葡萄糖為例)

圖片

由于Trinder反應(yīng)是一個酶促偶聯(lián)反應(yīng),其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性受到多種因素的影響,那么如果我們收到的患者血液體液標(biāo)本中含有大量的氧化還原物質(zhì)的話必然會對實驗造成干擾。所以在日常工作時應(yīng)注意這些干擾因素:

  1. 還原性物質(zhì)干擾:維生素C(抗壞血酸)、膽紅素、尿酸(在某些檢測中)、谷胱甘肽、藥物(如乙酰氨基酚、多巴胺)等具有強還原性。它們會競爭性地消耗反應(yīng)中產(chǎn)生的H?O?,或者直接還原紅色的醌亞胺染料,使其褪色,導(dǎo)致測定結(jié)果假性偏低。

  2. 內(nèi)源性過氧化物酶:血液樣本中可能含有內(nèi)源性的過氧化物酶(如血紅蛋白釋放出的),它可能在沒有待測物的情況下催化顯色反應(yīng),導(dǎo)致假性偏高。通常通過優(yōu)化試劑pH和加入抑制劑來控制。

  3. 樣本外觀:嚴(yán)重的溶血、黃疸或脂血會直接影響吸光度的讀數(shù),產(chǎn)生光譜干擾。

  4. 除此之外,如今雖然大多數(shù)實驗室都是自動化生化分析儀和IVD提供的良好的試劑,但反應(yīng)所需的條件(如pH、溫度、時間)、試劑濃度與穩(wěn)定性以及光源的穩(wěn)定性,也是要重點關(guān)注的。

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