|
蛋白質(zhì)錯誤折疊是所有常見的神經(jīng)退行性疾病最明顯的特征，每一種疾病都牽涉到不同的、但又相互重疊的主要蛋白質(zhì)--。α-突觸核蛋白（αSyn）作為突觸核蛋白病的致病誘因、疾病標志物和治療靶點已被廣泛研究。帕金森病（PD）的主要診斷標準主要依賴于臨床癥狀的組合，然而神經(jīng)退行性過程被認為是在觀察到明顯的臨床癥狀之前許多年就已經(jīng)開始了。因此，迫切需要在臨床癥狀出現(xiàn)之前識別高?；颊?。 圖1：論文封面圖 近年來，人們在確定特定的疾病標志物和開發(fā)早期檢測突觸蛋白病的診斷工具方面投入了大量的精力，其中許多都集中在檢測組織和生物液體中錯誤折疊的αSyn聚集物。 在為檢測αSyn形式而建立的不同檢測方法中，酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）是一種簡單和快速的技術(shù)，它允許敏感和特異性地定量分析有關(guān)的分析物，并且便于在臨床上進行大規(guī)模的篩選。盡管大多數(shù)為檢測αSyn蛋白形式而開發(fā)的ELISA檢測方法具有較高的分析精度、強有力的實驗室間和實驗室內(nèi)的相關(guān)性以及良好的可重復(fù)性，但在區(qū)分PD患者和對照組方面的診斷準確性一直不能令人滿意。 在探索αSyn蛋白形式（低聚物和/或聚集物）作為PD和路易體癡呆（DLB）的潛在生物標志物時，已獲得令人鼓舞的結(jié)果。一些研究表明，僅CSF中的總αSyn不是PD診斷或進展的可靠標志物，這表明αSyn的其他疾病相關(guān)形式可能更適合。研究表明，在PD和DLB患者中，CSF中的αSyn低聚物水平持續(xù)升高，并與PD運動功能呈正相關(guān)。我們以前描述了幾種ELISA檢測方法的發(fā)展，以檢測生物液體中的αSyn低聚物，使用同一抗體進行捕獲和檢測或構(gòu)象特異性抗體。 最近的研究表明，種子擴增法（SAAs）有能力檢測腦勻漿和CSF樣品中的αSyn疾病相關(guān)聚集物-。SAAs在區(qū)分PD和DLB患者與對照組受試者方面顯示出顯著的準確性。然而，目前的SAAs主要是二元測試（陽性或陰性），只有半定量的讀數(shù)，使得它們在監(jiān)測αSyn聚集物水平在疾病過程中的縱向變化或?qū)χ委煹姆磻?yīng)方面不夠理想。 本研究中探討的主要研究問題是：將αSyn SAA和寡聚物特異性ELISA結(jié)合起來，是否能提供準確和穩(wěn)健的可測量的測試讀數(shù)，以反映PD患者的疾病嚴重程度。人們一直在努力產(chǎn)生這樣的信息，或者通過計算SAA動力學參數(shù)、端點稀釋分析，或者使用參考標準作為解釋生物樣品中水平的指南。然而，目前的αSyn SAA在反映PD的嚴重程度、臨床表型或預(yù)后方面仍然不能令人滿意。 藉此，英國UCL的Nour Majbour等提出了一份全面的概念驗證報告，強調(diào)了我們創(chuàng)新的多重測試在提供CSF種子αSyn低聚物水平的強大定量讀出方面的臨床價值，該水平與疾病階段相關(guān)。 他們將種子擴增試驗（SAA）和酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）結(jié)合起來，以提供一個反映PD患者臨床嚴重程度的定量測試讀數(shù)。為了實現(xiàn)這一目標，他們首先用兩組人腦勻漿（試驗組和驗證組）探索了我們測試的潛力，然后用兩個獨立的人腦脊液隊列進行了驗證；發(fā)現(xiàn)組（62名PD和34名對照）和驗證組（49名PD和48名對照）。 低聚物特異性ELISA能穩(wěn)健地定量來自PD或DLB受試者的SAA終末產(chǎn)物，具有較高的敏感性和特異性分數(shù)（100%）。分析還表明，用低聚物ELISA作為測試讀數(shù)而不是單獨的SAA，可以更早地檢測到播種活動。更重要的是，復(fù)用檢測提供了關(guān)于患者臨床疾病階段的有力信息。
在發(fā)現(xiàn)隊列中，CSF種子αSyn低聚物的水平與PD臨床癥狀的嚴重程度相關(guān)，這是由UPDRS-運動（r=0.58，p<0.001）和H&Y評分（r=0.43，p<0.01）衡量的。在驗證隊列中觀察到CSF種子αSyn低聚物的濃度與UPDRS-運動（r= 0.50，p <0.01）和H&Y評分（r= 0.49，p <0.01）之間有類似的相關(guān)性。 20小時后，ROC分析得出的靈敏度為91.9%（95%CI，82.4%-96.5%），特異性為85.3%（95%CI，69.8 %-93.5%），曲線下面積為0. 在Discovery CSF隊列中，用CSF播種的αSyn寡聚體區(qū)分PD和對照組的敏感性為969，而用ThT Imax在同一時間點的敏感性為80.7%（95%CI，69.1%-88.5%），特異性為76.5%（95%CI，60.0 %-87.5%），曲線下面積為0.860。 該研究的重要意義在于發(fā)現(xiàn)了：結(jié)合SAA和ELISA檢測比單獨的SAA是更有希望的診斷工具，通過與疾病嚴重程度的臨床措施相關(guān)聯(lián)來提供有關(guān)疾病階段的信息。 原文出處 |
|
|
