（1）取成牛眼球，75%酒精消毒，取出周?chē)嘤嘟M織，用PBS洗3次，用PBS流水沖洗眼球3次。

（2）沿角膜緣剪開(kāi)眼球，棄掉角膜、晶體、玻璃體等部分，將眼球后半部翻轉(zhuǎn)取出視網(wǎng)膜，將其剪碎平皿內(nèi)加入適量0.25%的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中，采用分次消化，每次消化20min約8次。

（3）每次消化后取上清液，并加入等量的含10%的DMEM培養(yǎng)基，輕輕混勻，中和胰酶的消化，防止消化過(guò)度。用200目細(xì)胞過(guò)濾篩子過(guò)濾含細(xì)胞的混合液，最后將過(guò)濾后的細(xì)胞懸液1000rpm離心5min。離心后收集沉淀，用PBS再次重復(fù)離心3次。用細(xì)胞培養(yǎng)基將細(xì)胞沉淀重懸，接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，并每日觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)，接種后約4d后有少量細(xì)胞貼壁。