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病毒的檢測不同于常規(guī)的生化檢測,病毒本身是一種結(jié)構(gòu)簡單的微生物,必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)。采樣后,病毒離開寄主細(xì)胞,在采樣管內(nèi)其蛋白質(zhì)外殼和核酸都會很快降解,這樣核酸檢測時就無法判斷初始采集的樣本是否含有病毒,容易造成假陰性。所以我們要使用病毒保存液防止病毒的降解;同時還要防止病毒保存液長霉菌的現(xiàn)象出現(xiàn)。 1、滅活病毒保存液 當(dāng)前核酸檢測是對樣本中的病毒RNA進行檢測,需要將病毒裂解,所以只要能保證病毒核酸的完整和穩(wěn)定就可以了,不需要保存活病毒。它的優(yōu)勢是不僅能夠迅速高效地使待測樣本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止感染,同時又含有Rnase酶抑制劑,能保護病毒核酸不被降解,后續(xù)的NT-PCR實驗只要能檢測出病毒的核酸即可以做出診斷。而且能在常溫下保存相對較長的時間。 2. 非滅活型保存液 它是一種同時保留了病毒的蛋白質(zhì)外殼以及病毒核酸DNA或者RNA的保存液,這樣病毒在體外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,當(dāng)然操作失誤時也有一定的感染性風(fēng)險。采樣后長時間保存需要保持嚴(yán)格低溫。 3. 是否出現(xiàn)長霉菌的現(xiàn)象 現(xiàn)在市面上的很多非滅活病毒保存液出現(xiàn)長菌現(xiàn)象,專業(yè)的廠家會針對菌落進行了嚴(yán)格的控制,所以一般不會出現(xiàn)這個問題。 |
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