使用TRIS緩沖液將pH控制在約7-8范圍內(nèi)，常規(guī)更多的會使用磷酸鹽，因為其價格更加便宜，但是磷酸鹽會導(dǎo)致其測試樣品中的生物物質(zhì)發(fā)生不良反應(yīng)。

當(dāng)要在溶液上進行pH測量時，必須認識到涉及pH電極系統(tǒng)的另一種“不良反應(yīng)”。大多數(shù)組合pH電極使用的普通氯化銀-氯化銀參比電極具有氯化鉀鹽橋，該橋被氯化銀飽和。

這種系統(tǒng)在大多數(shù)樣品中均能很好地起作用，但在含有蛋白質(zhì)或相關(guān)物質(zhì)的生物樣品中卻不能很好地起作用。極低的銀離子濃度（約0.0001 M）足以與蛋白質(zhì)反應(yīng)，并在電極的多孔液結(jié)結(jié)構(gòu)中產(chǎn)生不溶的沉淀，因此由于產(chǎn)生大量的“液結(jié)”電勢而導(dǎo)致pH測量錯誤穿過沉淀物。

通過使用帶有甘汞參比內(nèi)部元素的電極或“雙結(jié)”設(shè)計，可以非常簡單地避免此問題。參比內(nèi)部電池都包含在鹽橋內(nèi)的玻璃管結(jié)構(gòu)中，而氯化鉀溶液中不含重金屬。因此，沒有不需要的沉淀物形成，參比結(jié)保持不堵塞，并且液接電位保持可以忽略不計。

Tris緩沖溶液中的準(zhǔn)確pH測量

Tris或tris（羥甲基）氨基甲烷已被廣泛用作生物介質(zhì)中的pH緩沖劑，已經(jīng)有約35年了。Tris不吸水，易溶于水，好的廠家純度也高，它不會沉淀鈣鹽，在室溫下可在溶液中穩(wěn)定數(shù)月，并且不會抑制許多酶系統(tǒng)。

在60年代后期，當(dāng)用于測量tris  pH的參比電極具有亞麻纖維接頭時，獲得的pH讀數(shù)將會出現(xiàn)不正確的情況，這個問題雖然很容易消除，但引發(fā)了許多有關(guān)與tris緩沖區(qū)一起使用的的問題。

此外，由于tris緩沖液的化學(xué)和物理性質(zhì)，使用不當(dāng)可能會導(dǎo)致pH值測量錯誤。建議使用tris緩沖液時選用最適合pH測量的電極系統(tǒng)。

Tris緩沖液的化學(xué)和物理性質(zhì)對pH的影響

tris緩沖液在其實際緩沖液范圍（pH 7至9）內(nèi)，緩沖液值，稀釋值和近似溫度系數(shù)。常用于生理測量的pH范圍（pH 7至7.5）中的tris沒有大的緩沖能力。因此，使用tris緩沖液控制樣品pH值時應(yīng)格外小心。

為了獲得準(zhǔn)確的結(jié)果，在使用tris進行標(biāo)準(zhǔn)化時會利用溫度pH依賴性，從而直接得出結(jié)論，使用tris來控制樣品的pH值時，控制程度將取決于樣品的溫度。如果樣品溫度變化2°C，則pH控制值將變化約0.06 pH單位。所需的pH控制將決定最大允許溫度波動。

使用tris來控制樣品的pH值時，應(yīng)考慮與樣品發(fā)生反應(yīng)的可能性，如tris與銀離子形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，則在使用tris來控制樣品的pH可以排除樣品中銀離子的存在。

使用Tris緩沖液進行PH測量

甘汞或銀/氯化銀類型參考對于大多數(shù)測量都是令人滿意的。但是，考慮引入重金屬離子（Ag +，Hg22 +）的可能性。當(dāng)使用甘汞參考液時，由于氯化汞相對于氯化銀的溶解度較低，因此不太可能出現(xiàn)此問題?？梢酝ㄟ^使用雙參比系統(tǒng)和任何一種參照物來避免將重金屬引入樣品中。

Tris緩沖液應(yīng)使用不含二氧化碳的蒸餾水或去離子水由高純度tris和HCl制成。

Tris緩沖液的pH值取決于溫度。為了最精確地工作，所有溶液都應(yīng)恒溫。