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雖然2010版GMP已經(jīng)實(shí)施了3年多了，但在談到環(huán)境監(jiān)控時，筆者還是經(jīng)常被問到一個問題：“無菌A級監(jiān)控時，采樣的頻率與采樣量究竟應(yīng)該是多少？”

筆者開始認(rèn)為，這個問題，似乎不用解釋了。但就一些細(xì)節(jié)設(shè)計(jì)上，確實(shí)還是存在還有很多爭論。例如有人問：“如果我的粒子計(jì)數(shù)器流量是28.3升/分鐘，監(jiān)測一分鐘后，我就應(yīng)該判斷結(jié)果，還是要等取樣35分鐘后，達(dá)到1立方米得到結(jié)果再評價？前者很容易超標(biāo)，前者似乎很難合格，后者很容易合格，后者似乎沒有什么意義”。

筆者在這里作個詳細(xì)分析，拋磚引玉。

首先，無菌A級區(qū)監(jiān)測頻率的問題基本沒有太多爭論。一般情況下，A級區(qū)的粒子監(jiān)控應(yīng)該涵蓋生產(chǎn)的全過程的連續(xù)監(jiān)測，包括準(zhǔn)備過程。這在附錄1的第十條第2項(xiàng)中有明確闡述：在關(guān)鍵操作的全過程中，包括設(shè)備組裝操作，應(yīng)對A級潔凈區(qū)進(jìn)行懸浮粒子監(jiān)測。

下面我們討論采樣量。在此之前，讓我們給他下個定義，什么是本文所指的“采樣量”。注意是本文定義，其他地方筆者不認(rèn)帳的。

1）首先它應(yīng)該是對應(yīng)單個取樣點(diǎn)的，不是多點(diǎn)累積值。您總不會將所有點(diǎn)的粒子結(jié)果數(shù)值加到一起，除以所有點(diǎn)的取樣體積吧，哈哈！

2）其次，它不是從監(jiān)控開始到監(jiān)控結(jié)束所有的多次累積的全程采樣體積。例如整個生產(chǎn)過程設(shè)備共采樣20個立方米等，沒人會這么想吧。

3）第三，所指的不是設(shè)備的單位時間采樣量，例如2.83升，28.3升，50升。否則，其他設(shè)備賣不掉了，哈哈！

4）它不一定與法規(guī)中所采用的標(biāo)準(zhǔn)單位相同，例如在附錄1中，A級，0.5um的粒子的合格標(biāo)準(zhǔn)是：每立方米的0.5um的粒子，應(yīng)小于等于3520個，這里選用了1立方米作為標(biāo)準(zhǔn)單位。換句話說，作為標(biāo)準(zhǔn)，可以公制，可以英制，3520/立方米可以換算成100個/立方英尺，那么采樣量必須就是1立方英尺了？這顯然不合情理。

還有一個旁證是：A級沉降菌的標(biāo)準(zhǔn)是1cuf/4小時，采樣量就必須4小時嗎？當(dāng)然不一定。很多培養(yǎng)皿4小時就干掉了，不容易長菌了，這時，我們可以用兩個90mm的平皿，每個放置2小時，連續(xù)累積就行。甚至，如果生產(chǎn)過程是3小時，企業(yè)監(jiān)控3小時沉降菌就可，然后用結(jié)果除以3再乘以4，最后與4小時標(biāo)準(zhǔn)比較。所以說：法規(guī)中所采用的標(biāo)準(zhǔn)單位是每立方米，不是說采樣量就必須一個立方米。

5）筆者的結(jié)論是：本文所指的采樣量是用于評價結(jié)果的采用量。也就是說，在這個采樣量達(dá)到后的結(jié)果將被我們所審視，或用于分析，或引起警覺，再或采取行動。

出了一身汗，終于可以開始了。

有人說，“這有什么討論的，法規(guī)規(guī)定了無菌A級應(yīng)采1立方米，我們必須按1立方米采樣。”筆者建議他/她仔細(xì)看看法規(guī)，在我國的2010版GMP，附錄一第九條第1項(xiàng)中明確規(guī)定，“為確認(rèn)A級潔凈區(qū)的級別，每個采樣點(diǎn)的采樣量不得少于1立方米?！?/p>

請注意這里的目的：為了確認(rèn)級別……

A級粒子監(jiān)控的目的，可能是用于確認(rèn)級別，也可能是用于過程監(jiān)控。

當(dāng)用于確認(rèn)級別時，采樣時間應(yīng)該長一些，采樣量應(yīng)該大一些，這樣的結(jié)果才有代表性。所以，法規(guī)規(guī)定不能小于1立方米。”動態(tài)和靜態(tài)的采用量是一致的，我想大家對此沒有什么異議了吧。

那么，作為日常生產(chǎn)過程動態(tài)監(jiān)控，取樣量應(yīng)該取多少呢？

讓我們還是從先從日常生產(chǎn)過程監(jiān)控的目的開始談起。筆者認(rèn)為日常過程監(jiān)控A級的目的是：“及時發(fā)現(xiàn)所有人為干預(yù)，偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)的損壞?！辈恍?，請看

在2010版GMP附錄1第10條第2款中規(guī)定：“在關(guān)鍵操作的全過程中，包括設(shè)備組裝操作，應(yīng)對A級潔凈區(qū)進(jìn)行懸浮粒子監(jiān)測。A級潔凈區(qū)監(jiān)測的頻率及取樣量，應(yīng)能及時發(fā)現(xiàn)所有人為干預(yù)、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)的損壞。灌裝或分裝時，由于產(chǎn)品本身產(chǎn)生粒子或液滴，允許灌裝點(diǎn)≥5.0μm的懸浮粒子出現(xiàn)不符合標(biāo)準(zhǔn)的情況。”

筆者認(rèn)為，這里的人為干預(yù)行為，包括日常干預(yù)和糾正性干預(yù)。如果舉例的話：放置沉降碟算是日常干預(yù)，倒瓶后的處理一般算是糾正性干預(yù)。

偶發(fā)事件，例如灌裝用柱塞泵堵塞，工人進(jìn)行更換，料液遺灑后的處理等

系統(tǒng)損壞，例如FFU停機(jī)等，系統(tǒng)停電等。

顯而易見，我們在無菌生產(chǎn)過程中，因?yàn)閾?dān)心“上述三種活動“可能產(chǎn)生或攜帶微生物，而這些微生物進(jìn)入我們的無菌藥品可能造成產(chǎn)品的污染。所以，我們要進(jìn)行粒子監(jiān)測

那么，發(fā)生這些行為與粒子有什么關(guān)系呢？

首先一個基本的微生物常識是：空氣中如果沒有粒子，就不容易存在微生物。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)表明：絕大多數(shù)微生物必須附著在粒子上，才能實(shí)現(xiàn)在空氣中漂浮。我們監(jiān)測粒子的目的是間接尋找微生物的存在?；蛘哒f，沒有粒子，間接證明微生物存在的可能性很小很小。

由于我們的粒子監(jiān)測取樣點(diǎn)都位于產(chǎn)品周圍，如果干預(yù)不當(dāng)，或系統(tǒng)的損壞發(fā)生，我們的粒子數(shù)據(jù)有可能提示我們這些情況。換句話說，如果上述行為引起了粒子的波動，我們應(yīng)盡可能即使發(fā)現(xiàn)。所以，我們進(jìn)行過程監(jiān)測的目的是發(fā)現(xiàn)和評估這些行為對產(chǎn)品的影響。那么，及時發(fā)現(xiàn)肯定比滯后發(fā)現(xiàn)更好。

所以，本文的結(jié)論是：對于無菌生產(chǎn)過程的粒子監(jiān)控，采樣量不宜太大，法規(guī)沒有要求1立方米。如果采用28.3升的粒子采樣器，35分鐘的結(jié)果滯后嚴(yán)重，1立方米的采樣量進(jìn)行結(jié)果判斷是不很合理。筆者見到部分企業(yè)雖然是每一分鐘都有數(shù)值顯示，但這一分鐘顯示的數(shù)值是基于前面60分鐘的計(jì)算平均值，（目的是追求1立方米進(jìn)行取樣），這樣作，異常情況同樣被掩蓋。

雖然得到以上結(jié)論，但筆者并不認(rèn)為，采樣量越小越好。我們應(yīng)從實(shí)際出發(fā)考慮。如果，安裝后粒子計(jì)數(shù)器受到干擾因素較多，穩(wěn)定性較差，可以適當(dāng)延長采樣時間，加大采樣量。

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