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臨床所想知道的免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)

 資料的庫 2019-04-03

胸科之窗

這不僅僅是一個公眾號......

朱紅

病理學(xué)主任醫(yī)師

北京和睦家醫(yī)院病理科,畢業(yè)于香港大學(xué)病理系,獲得醫(yī)學(xué)博士學(xué)位。 有20多年的臨床病理診斷工作經(jīng)歷并積累了較豐富的 經(jīng)驗。參與了北京和睦家醫(yī)院病理科美國病理學(xué)家學(xué)會(CAP)認證的審查。在國內(nèi)核心期刊和國外檢索性期刊SCI上發(fā)表論文二十余篇。并擔(dān)任北京乳腺病防治學(xué)會病理診斷專業(yè)委員會委員。

為什么要做免疫組化


人體的器官和組織都是由受精卵→胚芽→胚胎→胎兒這個順序發(fā)育過來的,而組成器官和組織的細胞 都是由胚芽時期的外胚層、中胚層、內(nèi)胚層這三個胚層分化而來的。我們可以把同一胚層形成的 細 胞比喻成為“親兄弟姐妹”,那么不同胚層形成的細胞,我們可以比喻成為“表兄弟,表姐妹”,因 為他們都來源于同一個“祖”細胞→受精卵。

人體內(nèi)很多器官和組織內(nèi)的組成細胞,由于起源一致,在形態(tài)結(jié)構(gòu)上非常相似,有很多時候是很難靠 形態(tài)來區(qū)分的,在過去沒有免疫組化的情況下,人為的識別是一種經(jīng)驗積累,有很強的主觀性,當(dāng) 然錯誤就難以避免。

其實我們可以把免疫組化比喻成為細胞的“血型”鑒定(當(dāng)然細胞類型遠遠比真正血型多很多很多)。

什么是免疫組化

在上世紀30年代,免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry,簡稱IHC)的原理就已經(jīng)為人所知,但直到 1942年,第一個IHC研究成果才正式發(fā)表。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,而histo意味著 組織。

免疫組化是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織原位通過抗原抗體翻譯和組織化學(xué)的呈色反應(yīng),對相 應(yīng)抗原進行定性、定位、半定量測定。它把免疫反應(yīng)的特異性、組織化學(xué)的可見性巧妙結(jié)合起來,借 助顯微鏡在細胞/亞細胞水平檢測各種抗原物質(zhì)(如蛋白、酶、激素、病原體等)。

具體方法很多:直接法、間接法、PAP法、ABC法、LSAB法、EnVision法…..

步驟(EnVision兩步法):組織充分固定-脫水-包埋-切片——脫蠟至水 抗原修復(fù)——封閉內(nèi)源性過氧化物酶 一抗孵育——二抗孵育——顯色(DAB) 復(fù)染-封片。

IHC在診斷和臨床中的作用

目前:高敏的檢測系統(tǒng)、有效的抗原修復(fù)、不斷新增的抗體使免疫組化在外科病理學(xué)中的作用越來越突出。

一、腫瘤細胞特異性抗體表達與鑒別診斷

二、腫瘤惡性程度與預(yù)后

Ki-67(腫瘤增殖指數(shù))、p16(宮頸CIN)、ER, PR (乳腺癌)……

三、 腫瘤藥物的使用指導(dǎo)

ER, PR, AR: 內(nèi)分泌治療、Her2:乳腺癌靶向治療、ALK: 肺癌靶向治療、CD20: 淋巴瘤靶向治療、PD-1, PD-L1: 腫瘤免疫治療。

免疫組化是外科病理學(xué)中不可或缺的重要手段,類似于放大鏡,幫助病理醫(yī)生做出最后診斷。

沒有一個免疫組化指標(biāo)是絕對特異的,腫瘤的表達經(jīng)常會與正常表達有偏離。

免疫組化要以HE形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ),且不提倡以單獨的組化指標(biāo)作為診斷依據(jù),要根據(jù)鑒別診斷來選擇一組抗體,也不提倡盲目選擇大范圍做組化。

右上肺葉腫物穿刺一例

8 X 免疫組化染色切片

HE染色切片所見:在纖維組織中可見密集的小細胞彌漫生長,未見特異性結(jié)構(gòu)(腫瘤分化低,鑒別診斷包括:未分化癌、小細胞癌、淋巴瘤等)。

免疫組化: CK, TTF-1, CD56, Syn, CgA陽性;P40, NapsinA陰性; Ki-67 指數(shù): 60%

分別為:CK+、TTF1+、NapsinA、P40-、CD56、Syn、CgA+(所有神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物陽性)。

Ki -67指數(shù): 60。最后診斷:(右肺上葉腫物粗針穿刺):肺小細胞癌。

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