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分子生物學(xué)實驗室內(nèi)常見有毒物質(zhì)及防護措施

 bluewhale 2016-01-04





分子生物學(xué)實驗室中研究對象主要是細(xì)胞,DNA,RNA和蛋白質(zhì)。實驗過程中我們常常要對這些實驗對象進行觀察,提取,裂解等操作。然而,要知道我們?nèi)梭w本身就是由細(xì)胞組成的,細(xì)胞內(nèi)包括DNA,RNA,蛋白質(zhì)。所以對這些實驗對象進行操作時,使用的很多試劑也會對我們身體產(chǎn)生危害。今天,小編就為大家介紹一下分子生物學(xué)實驗室中常見的幾種有毒物質(zhì)以及防護措施。如果有遺漏的,歡迎小伙伴們來信討論補充。


溴化乙錠EB

溴化乙錠(EB)是一種高度靈敏的熒光染色劑,用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標(biāo)準(zhǔn)302 nm紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號。溴化乙錠含有一個可以嵌入DNA堆積堿基之間的一個三環(huán)平面基團。它與DNA的結(jié)合幾乎沒有堿基序列特異性。在高離子強度的飽和溶液中,大約每2.5個堿基插入一個溴化乙錠分子。當(dāng)染料分子插入后,其平面基團與螺旋的軸線垂直并通過范德華力與上下堿基相互作用。這個基團的固定位置及其與堿基的密切接近,導(dǎo)致與DNA結(jié)合的染料呈現(xiàn)熒光。溴化乙錠具有一定的毒性,皮膚吸收可造成傷害。刺激眼睛、皮膚、黏膜和上呼吸道??烧T導(dǎo)突變并可能致癌。戴好手套和護目鏡,穿好防護服,在通風(fēng)櫥內(nèi)小心操作。


二甲基亞砜DMSO

二甲基亞砜(DMSO),是一種滲透性保護劑,用途廣泛,能夠降低細(xì)胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細(xì)胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。研究表明,DMSO存在嚴(yán)重的毒性作用,與蛋白質(zhì)疏水集團發(fā)生作用,導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,具有血管毒性和肝腎毒性。

(1) 吸入:高揮發(fā)濃度可能導(dǎo)致頭痛,暈眩和鎮(zhèn)靜。

(2) 皮膚:能夠灼傷皮膚并使皮膚有刺痛感,如同所見的皮疹及水泡一樣。若二甲基亞砜與含水的皮膚接觸會產(chǎn)生熱反應(yīng)。

(3) 吸收:吸收危險性很低。

用的時候要避免其揮發(fā),要準(zhǔn)備1%-5%的氨水備用,皮膚沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗滌。


丙烯酰胺

聚丙烯酰胺是SDS-PAGE凝膠中的主要成分。未聚合的丙烯酰胺是一種潛在的神經(jīng)毒素,可通過皮膚吸收。丙烯酰胺的危害主要是引起神經(jīng)毒性,同時還有生殖、發(fā)育毒性。神經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學(xué)習(xí)、記憶和其他認(rèn)知功能部位的退行性變化,試驗還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物,職業(yè)接觸人群的流行病學(xué)觀察表明,長期低劑量接觸丙烯酰胺會出現(xiàn)嗜睡、情緒和記憶改變、幻覺和震顫等癥狀,伴隨末梢神經(jīng)病如手套樣感覺、出汗和肌肉無力。具有累積毒性,不容易排毒。因此在稱量丙烯酰胺和亞甲基雙酰胺粉末時,戴好手套和面罩,在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作。聚合的丙烯酰胺是無毒的,但是使用時也應(yīng)小心,因為其中可能喊有少量未聚合的丙烯酰胺。


二硫蘇糖醇(DTT)

二硫蘇糖醇(DTT),同巰基乙醇一樣是很強的還原劑,散發(fā)難聞的氣味??捎米鞯鞍踪|(zhì)的保護劑,用于防止蛋白質(zhì)內(nèi)的半胱氨酸被氧化。也可用于SDS-PAGE電泳時樣品的添加劑,用于徹底打破蛋白質(zhì)中的二硫鍵??梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而危害健康。當(dāng)使用固體或高濃度儲存液時,戴手套和護目鏡,在通風(fēng)櫥中操作。


苯甲基磺酰氟(PMSF)

苯甲基磺酰氟(PMSF),常用于蛋白質(zhì)的提取過程中,是胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶的抑制劑,可抑制絲氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶(trypsin)和胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin),也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰膽堿酯酶,是一種高強度毒性的膽堿酯酶抑制劑。它對呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性??梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而致命。戴合適的手套和安全眼鏡,始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里使用。在接觸到的情況下,要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚,已污染的工作服丟棄掉。


二乙基焦碳酸酯DEPC

DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylpr℃arbonate),可滅活各種蛋白質(zhì),是RNA酶的強抑制劑。DEPC是一種潛在的致癌物質(zhì),在操作中應(yīng)盡量在通風(fēng)的條件下進行,并避免接觸皮膚。DEPC毒性并不是很強,但吸入的毒性是最強的,使用時戴口罩。不小心沾到手上注意立即沖洗,RNaseAwayTM試劑可以替代DEPC,操作簡單,價格低,且無毒性。只需將RNaseAwayTM直接倒在玻璃器皿和塑料器皿的表面,浸泡后用水沖洗去除,即可以快速去除器皿表面的RNase,并且不會殘留而干擾后續(xù)實驗。


紫外光

紫外光是實驗室中常見的光源。能夠用在無菌室進行滅菌,也會用來觀察凝膠中的DNA。紫外光可損傷眼視網(wǎng)膜。切勿用裸眼和沒有防護裝置的紫外光源。在實驗室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀。只能通過吸收有害波長的濾片或安全玻璃片才能觀察。紫外線也是誘變劑和致癌的。為使暴露減少到最低限度,確保紫外光源要采用適當(dāng)防護裝置。在紫外光下操作時要戴合適的預(yù)防性手套。



甲醇

甲醇常常用于分析試劑或者清除去油劑,有很大的毒性并易揮發(fā)。甲醇的毒性對人體的神經(jīng)系統(tǒng)和血液系統(tǒng)影響最大,它經(jīng)消化道、呼吸道或皮膚攝入都會產(chǎn)生毒性反應(yīng),甲醇蒸氣能損害人的呼吸道粘膜和視力。急性中毒癥狀有:頭疼、惡心、胃痛、疲倦、視力模糊以至失明,繼而呼吸困難,最終導(dǎo)致呼吸中樞麻痹而死亡。慢性中毒反應(yīng)為:眩暈、昏睡、頭痛、耳鳴、視力減退、消化障礙。使用時要避免吸入其揮發(fā)的汽霧。要戴合適的手套和安全眼鏡。



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