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環(huán)境安全型畜禽舍微生物的檢測方法

 富硒幫富硒食品 2011-08-25

環(huán)境安全型畜禽舍微生物的檢測方法   畜禽防疫設(shè)備與技


隨著環(huán)境安全型畜禽舍理念的推廣,其實(shí)施地域愈來愈廣泛,核心設(shè)備3DDF系列畜禽舍空氣電凈化自動防疫系統(tǒng)和糞道等離子體除臭滅菌系統(tǒng)的使用量愈來愈大,一些用戶還研究了這種新型的畜禽舍中空氣微生物濃度的變化和臭氣,眾多的實(shí)踐肯定了核心設(shè)備的優(yōu)良性能,并成為積極地推廣者。然而,也有一些客人的測定結(jié)果與他人很不同,其原因就在于檢測方法的不同,下面就測定的標(biāo)準(zhǔn)做一表述,以期望大家做出基本一致的結(jié)果,并喚起其他養(yǎng)殖企業(yè)的青睞。

環(huán)境安全型畜禽舍微生物的檢測方法

 

   1.環(huán)境要求

   (1)全封閉;

   (2)無空氣擾動(不通風(fēng));

   (3)相對濕度:40-70%;

   (4)溫度:0-32℃

   2.測定方法

   2.1.菌濃度的檢驗(yàn)(見附文)

   (1)沉降法

   (2)撞擊法

   (3)過濾法

   (4)簡易定量測定法

   2.2.測定方法

   (1)一般要求

    a.按照檢測需要的環(huán)境要求選取全封閉的對照舍和試驗(yàn)舍;如果沒有合適的對照舍則需要關(guān)停試驗(yàn)舍的空間電場和除臭設(shè)備3天的畜禽舍作為原始菌濃度的對照舍,取樣測定完畢后再行啟動前述設(shè)備并在3日后同一時(shí)間進(jìn)行檢測。

    b.每舍按照田字形選定取樣點(diǎn),每舍取樣點(diǎn)至少5點(diǎn)。

    c.取樣高度:網(wǎng)床或籠養(yǎng)雞舍為距地面0.8-1.5m的高度處。豬和網(wǎng)上肉雞舍取小值,籠養(yǎng)蛋雞取大值;對于地面養(yǎng)殖舍,取樣高度為0.45-1.0m。雞鴨等小型動物取小值,牛羊等大型動物取大值。

    d.試驗(yàn)與對照舍同時(shí)取樣。如無對照舍可參照前述a的描述進(jìn)行取樣。

   (2)定時(shí)器控制的空間電場間歇循環(huán)出現(xiàn)的環(huán)境

    a.空間電場系統(tǒng)工作3天后方可取樣檢測。

    b.取樣時(shí)間應(yīng)在空間電場系統(tǒng)停止工作后的10分鐘內(nèi)結(jié)束。(空間電場工作期間采樣獲取的數(shù)值會因電場的除塵作用而增大,故不予采用)

    c.推薦方法:建議優(yōu)先采用撞擊法,其次采用沉降法。

   (3)空間電場恒定出現(xiàn)的環(huán)境

    a.空間電場系統(tǒng)持續(xù)工作2天后方可取樣檢測。

    b.推薦方法:建議優(yōu)先采用撞擊法,其次采用沉降法。

    3.其他

    作為環(huán)境安全型畜禽舍,由于動物的活動,每時(shí)每刻的空氣微生物濃度都在變化,最完善的測定應(yīng)該是日監(jiān)測,即喂料時(shí)刻、吃料高峰期過后、休息三個(gè)時(shí)間段的空氣微生物濃度變化。

    4.評價(jià)

    某些取樣可造成菌群的無法計(jì)數(shù),此時(shí)應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)給出估測:或根據(jù)灰暗程度給出判斷。

    5.結(jié)果分析

    通常由控制器控制的空間電場環(huán)境中空氣微生物濃度日變化要比對照低30-70%,這樣的低濃度有助于動物自然抗體的產(chǎn)生,也就是出欄的仔豬和雛雞放在農(nóng)家好養(yǎng)。而在恒定工作的空間電場環(huán)境中,空氣微生物濃度的日變化約為對照的40-90%,防疫效果好,但設(shè)備投入成本高。

附文:空氣微生物的檢驗(yàn)方法

   

一、沉降法

    將盛有培養(yǎng)基的平皿放在空氣中暴露一定時(shí)間,經(jīng)培養(yǎng)后計(jì)算出其上所生長的菌落數(shù)。此法簡單,使用普遍,由于只有一定大小的顆粒在一定時(shí)間內(nèi)才能降到培養(yǎng)基上,因此,所測得微生物數(shù)量欠準(zhǔn)確,檢驗(yàn)結(jié)果比實(shí)際存在數(shù)量少,并且也無法測定空氣質(zhì)量,所以,僅能粗略計(jì)算空氣污染及了解被測趣味生物的種類。

【檢驗(yàn)方法】

(1)將一直被好的營養(yǎng)瓊脂、查氏培養(yǎng)基及高氏1號三種平板置于待測地點(diǎn),打開皿蓋在空氣中暴露5~10min。

(2)蓋上培養(yǎng)皿蓋,置于℃培養(yǎng)24~45h,根據(jù)平板上所生長的菌落數(shù)計(jì)算出1m³或1L空氣中的細(xì)菌總數(shù)。

(3)計(jì)算,奧梅梁斯基認(rèn)為:在面積為100cm2平板瓊脂培養(yǎng)基表面上,5min降落的細(xì)菌數(shù)經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后生長的菌落數(shù)和10L空氣中所含的細(xì)菌數(shù)相當(dāng)。根據(jù)奧氏公式計(jì)算

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式中X—每1m³空氣中的細(xì)菌個(gè)數(shù);

式中N—5min降落在平板上,經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后生長的菌落數(shù);

式中r—平皿底半徑。

    經(jīng)測定發(fā)現(xiàn),用奧氏公式計(jì)算的浮游細(xì)菌數(shù)比實(shí)測的浮游細(xì)菌少。原因是此公式?jīng)]有考慮塵埃粒子大小、數(shù)量、氣流情況、人員密度和活動情況。

 

二、撞擊法

    以縫隙采樣器為例,用吸風(fēng)機(jī)或真空泵江含菌空氣以一定流速穿過狹縫而被抽吸到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)及平板上。狹縫長度為平皿的半徑,平板與縫的間隙有2㎜,平板以一定的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)。通常平板轉(zhuǎn)動一周,取出置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)的48h,根據(jù)空氣中微生物的密度可調(diào)節(jié)平板狀動的速度。采集含菌高的空氣樣品時(shí),平板轉(zhuǎn)動的速度要比含菌最低的空氣樣品的轉(zhuǎn)速快。根據(jù)取樣時(shí)間和空氣流量算出單位空氣中的含菌量。采樣器的規(guī)格各國不一,可按說明書操作。

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三、過濾法

    該法是抽取定量空氣通過一種液體吸收劑,然后取此液體定量培養(yǎng)計(jì)數(shù)出菌落數(shù)。

   (1)將無菌的液體培養(yǎng)基或無菌水與真空泵相連,以每分鐘10L速度取空氣樣并劇烈震蕩,使阻流在液體中的氣溶膠或微生物均勻分散。

   (2)吸取上述含菌液體吸收液1mL與融化冰冷卻到45℃左右的營養(yǎng)液瓊脂做傾注培養(yǎng),同時(shí)做三個(gè)平行試驗(yàn),置37℃恒溫箱中培養(yǎng)48h,計(jì)算平均菌落數(shù)。根據(jù)下列公式計(jì)算

 

式中X—每1m³空氣中的細(xì)菌數(shù);

式中Vs—吸收液體量,mL;

式中Va—空氣過濾量,L;

式中N—每1mL液體培養(yǎng)基中的細(xì)菌數(shù)。

 

四、簡易定量測定法

    用無菌注射器定量抽取空氣,將所取空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)部,經(jīng)培養(yǎng)后,即可定量、定性測定空氣中微生物,此法簡單易行。

   (1)將無菌固體培養(yǎng)基融化后,在50℃水浴中保溫備用。

   (2)利用50~100mL無菌注射器抽取待測環(huán)境空氣20~100mL。

   (3)在無菌操作下,取已融化培養(yǎng)基倒入無菌平皿中,平皿稍作傾斜,將注射器插入培養(yǎng)基深處,緩慢將空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi),輕輕搖勻以消除氣泡。待培養(yǎng)基凝固,置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)3d后統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)量,推算1L空氣所含菌量。通過菌落形態(tài)定性微生物,如統(tǒng)計(jì)霉菌數(shù)量時(shí)培養(yǎng)的時(shí)間稍許延長。應(yīng)用此法需多做平行試驗(yàn),求其平均值以提高準(zhǔn)確性。

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