二．實(shí)驗(yàn)原理：某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。

1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。如：

葡萄糖+ Cu ( OH )2   葡萄糖酸 + Cu 2O↓（磚紅色）+ H 2O，

即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）。淀粉遇碘變藍(lán)色。

3．蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。（蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。）

三．實(shí)驗(yàn)材料

1．做可溶性還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。（因?yàn)榻M織的顏色較淺，易于觀察。）

2．做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。應(yīng)選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡3~4小時(shí)（也可用蓖麻種子）。

3．做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)，可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。

四、實(shí)驗(yàn)試劑

斐林試劑（包括甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液：質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液）、體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液，碘液、蒸餾水

五、方法步驟：

（一）可溶性糖的鑒定

操 作 方 法  注 意 問 題  解 釋

1. 制備組織樣液。（去皮、切塊、研磨、過濾）    蘋果或梨組織液必須臨時(shí)制備。       因蘋果多酚氧化酶含量高，組織液很易被氧化成褐色，將產(chǎn)生的顏色掩蓋。

2. 取1支試管，向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。           

3. 向試管內(nèi)注入1mL     新制的斐林試劑，振蕩。    應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存，使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑；

切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進(jìn)行檢測。       斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時(shí)，生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入時(shí)可能會與組織樣液發(fā)生反應(yīng)，無     Cu ( OH ) 2生成。

4. 試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中，加熱約2分鐘，觀察到溶液顏色：淺藍(lán)色 → 棕色 → 磚紅色（沉淀）       最好用試管夾夾住試管上部，使試管底部不觸及燒杯底部，試管口不朝向?qū)嶒?yàn)者。也可  用酒精燈對試管直接加熱。       防止試管內(nèi)的溶液沖出試管，造成燙傷；縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。